诱导干细胞的制备,诱导干细胞发育成特定的组织

如何诱导胚胎干细胞分化

1、ES细 胞体外定向诱导分化的原理，就是选择适当的诱 导剂和诱导模式，通过诱导物与细胞表面受体结 合或使细胞发生轻度可逆性损伤等，使被诱导细 胞按预定的细胞类型方向分化，然后将这些定 向分化的细胞进行分离和培养传代，从而得到人 们所需要的细胞类型。

2、胚胎干细胞在体外培养条件下，可以保持只分裂而不分化的状态，如果要时期分化，需要加入一些分化诱导因子，如牛磺酸、丁腺环腺甘酸等化学物质，可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化。

3、常用的体外诱导方法是在体外培养的成体干细胞中加人入诱导因子。诱导因子包括各种能影响细胞分化的物质，如血清、糖分、维生素、以及各种蛋白因子等。日本学者Oh等首先报道，高浓度肝细胞生长因子(HGF)体外诱导大鼠骨髓细胞分化为肝细胞，并表达CK8， CK18， ALB等。

4、Sciences上的一篇研究论文中，来自日本理化研究所的研究人员通过利用携带信号分子的细胞培养系统来诱导人类胚胎干细胞分化形成处于外胚层的神经组织，结果将其转化成为大脑皮层组织；《Nature Methods》发表的一项研究表明改变细胞集群的几何形状可用于指导干细胞分化为特定类型的细胞或组织。

我国科学家在干细胞制备技术上取得新突破,该技术可以应用于哪些临床实验...

1、近年来，诱导多能干细胞技术的建立，在细胞治疗、药物筛选和疾病模型等领域产生了广泛的应用价值，尤其是为患者构建自体特异性干细胞系，大大加速了干细胞临床应用的进程。

2、干细胞制备技术在癌症治疗领域的突破为治愈这一疾病带来了希望。通过将溶瘤病毒注入干细胞，这些干细胞能够识别并特异性地杀灭癌细胞，标志着癌症治疗的一大进步。若该技术得到广泛应用，癌症的治愈可能变得像治疗感冒一样普遍。

3、该技术可以治愈糖尿病：通过灵长类生物实验证明：该干细胞可以在胰脏处分化为胰岛细胞，于是受损胰岛细胞就可以通过外源干细胞注入来获得补充，于是胰岛素就可以正常分泌了。于是糖尿病就得到解决了。

4、细胞工程作为科学研究的一种手段，已经渗入到生物工程的各个方面，成为必不可少的配套技术。在农林、园艺和医学等领域中，细胞工程正在为人类做出巨大的贡献。\x0d\x0a\x0d\x0a粮食与蔬菜生产\x0d\x0a利用细胞工程技术进行作物育种，是迄今人类受益最多的一个方面。

5、除此之外，科学家还将干细胞技术用于组织器官的再生、药物筛选和疾病模型的建立等，不断发掘干细胞的无限潜能，为医学技术的发展劈开一条新的道路！干细胞技术推动了临床科研和生命科技的进步。

6、干细胞与再生医学：中国在干细胞研究领域取得了突破性进展。科学家们成功培养出人类干细胞，并已将其应用于医学治疗，如帕金森病的治疗。同时，中国在干细胞药物开发方面也取得了重要进展。 生物技术：生物技术领域的中国创新成果同样引人注目。

什么是诱导多能干细胞

1、诱导多能干细胞是对成熟细胞“重编程”得到的，像胚胎干细胞一样具备分化成多种细胞的潜力，可用于修复受损的组织和器官。“基因剪刀”指ＣＲＩＳＰＲ基因编辑技术，用它能像在电脑上编辑文章一样，精确查找一串代码在基因组中的位置，进行删除或修改。

2、通过采用导入外源基因的方法使体细胞去分化为多能干细胞，对于这类干细胞我们称之为诱导多能干细胞 iPS技术 iPS技术是干细胞研究领域的一项重大突破，它回避了历来已久的伦理争议，解决了干细胞移植医学上的免疫排斥问题，使干细胞向临床应用又迈进了一大步。

3、诱导多能干细胞是对成熟细胞重编程得到的，像胚胎干细胞一样具备分化成多种细胞的潜力，可用于修复受损的组织和器官。CRISPR基因编辑技术能精确查找一串代码在基因组中的位置，进行删除或修改。\x0d\x0a\x0d\x0a每个细胞都拥有生物的全套基因组，其具体身份和功能取决于哪些基因处于工作状态。

请教间充质干细胞成脂诱导分化培养基的配制

天后半量换液，第10天当观察到少量细胞变为梭形、贴壁，即全量换液，改为条件培养基。此后每3-4天换1次条件培养基。倒置显微镜隔日观察，直至细胞不能传代、衰老死亡为止。下面就是爬片的制作，染色以及结果判定了。

◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的，现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用，得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物，这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。

将干细胞以5×105 每孔的密度接种在六孔板中，以正常培养基培养的样本为成脂分化实验阴性对照组，以成脂诱导培养基培养的样本为阳性对照组。

培养与观察细胞被计数后，置于恒温培养箱中，10% CO2环境中培养，密切关注细胞状态，适时更换培养基以维持最佳生长环境。 成骨与脂诱导的诱导分化当细胞密度达到80%时，进行传代。成骨诱导过程中，细胞被消化并接种，定期更换培养基，观察钙盐结晶并通过ARS染色和BMPRunx2表达鉴定。

冻存液的配制：70%的完全培养基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。胚胎干细胞(embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞。)胚胎干细胞是早期胚胎(原肠胚期之前)或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。

诱导性多能干细胞可以人工合成吗

研究人员用来产生诱导性多能干细胞(induced pluripotent stem cells， iPSCs)的方法既花时间而且效率又低。按照当前的方法，当把四种转录因子导入成体细胞如皮肤细胞中时，利用上千个皮肤细胞最终只能获得几个iPSCs。

该技术包括首先从雄性老鼠身上提取皮肤细胞，然后将其转化成类似干细胞的状态，以创建所谓的诱导性多能干细胞（iPS cells）——一种可以转化为其他类型细胞的细胞。因为该皮肤细胞从雄性老鼠身上提取，因此具有XY染色体。

随后世界各地不同科学家陆续发现其他方法同样也可以制造这种细胞。2007年11月20日，美国威斯康星大学詹姆斯·汤姆森的研究小组在科学杂志发表体细胞转变成“诱导性多能干细胞”（iPS细胞）的成果，而日本京都大学教授山中申弥领导的研究小组也于同日在《细胞》杂志发表类似的研究结果。

研究过程中，科学家们首先从雄性老鼠身上采集皮肤细胞，将其重新编程至类似干细胞的状态，以产生所谓的诱导性多能干细胞（iPS细胞）——这种细胞能够分化成多种类型的细胞。通过剔除一个Y染色体并引入一个X染色体，林克彦教授的研究团队设法将雄性干细胞转变为卵细胞。

iPS细胞又称诱导多功能干细胞，其神奇之处要从胚胎干细胞说起。胚胎干细胞一直是干细胞研究中的大明星，因为它能分化成各种器官细胞，具有最广泛的发展潜力。从技术角度来说，“全能性”的胚胎干细胞对于治疗性克隆来说是最理想的。

诱导性多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPS）具有类似于胚胎干细胞的全能性，又无道德伦理争议，而且来源广泛，避免了免疫排斥反应，为整个干细胞生物学领域和临床再生医学提供了新的研究方向。因此，在2008年该技术被评为十大进展之首；在2012年获诺贝尔生理学或医学奖。

向干细胞培养基中加入什么可以诱导其特定分化

1、主要还是生长素与细胞分裂素的比例。生长素比较多，倾向于长根；细胞生长素比较多，倾向于发芽。

2、无血清培养基，BeYaMA 1人多能干细胞无血清培养基是为人胚胎干细胞（ESCs）和人诱导多能干细胞（iPSCs）量身定制的无血清培养基，产品成分明确、无需滋养层细胞，可在长期传代培养过程中良好的维持人胚胎干细胞（ESCs）和人诱导多能干细胞（iPSCs）的良好的细胞形态、多能性和稳定性。

3、这两种细胞的分化条件相似，都是分为5个阶段，第一阶段将胚胎干细胞在添加白血病抑制因子(LIF)的培养基中诱导增殖，并维持其未分化状态；第二阶段在无血清的培养基中诱导其形成拟胚体，此后模仿体内胚胎发生的条件，依次改变拟胚体的生长环境，诱导其分化出特定细胞。