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三抗(青霉素-链霉素-庆大霉素溶液100X)

三抗（青霉素-链霉素-庆大霉素溶液100X）是专为细胞培养设计的抗菌剂，其抗菌范围涵盖细菌，并对某些支原体具有抑制效果。

青霉素-链霉素-庆大霉素溶液(100X)是专门为细胞培养设计的三抗，抗菌范围包含细菌和某些支原体。其成分包括青霉素，为β-内酰胺类抗生素，作用机制为抑制细菌细胞壁合成干细胞里面含有青霉素吗；链霉素和庆大霉素，则是氨基糖苷类抗生素，通过抑制细菌蛋白质合成起效。其中，庆大霉素对特定的支原体也有抑制效果。

三抗溶液(100X)是细胞培养领域中常用的一种抗菌剂。其配方包括青霉素、链霉素和庆大霉素，抗菌范围涵盖干细胞里面含有青霉素吗了细菌，对某些支原体也具有抑制作用。青霉素为β-内酰胺类抗生素，作用机制是抑制细菌细胞壁的合成。链霉素和庆大霉素属于氨基糖苷类抗生素，通过抑制细菌蛋白质合成发挥抗菌效果。

青链霉素混合液（100X）专用于细胞培养，通过滤除菌处理，无需额外灭菌即可直接添加至细胞培养液，使用时按100倍稀释。青霉素作为β-内酰胺类抗生素，其作用机制是抑制细菌细胞壁合成；链霉素和庆大霉素属氨基糖苷类抗生素，其主要功能是抑制细菌蛋白质合成，形成综合抗菌保护。

也有报道的三抗溶液配方为干细胞里面含有青霉素吗：(青霉素500 u*ml-1，庆大霉素100 u.ml-二性霉素B 5 μg.ml-1)。由于庆大霉素注射液一般都是用其硫酸盐加注射用水配成的。所以在配制三抗溶液时，无需非得用庆大的粉剂，按需要量计算好，加硫酸庆大霉素注射液稀释配制即可。

抗生物质(antibiotic)，包括青霉素、链霉素、庆大霉素等，用量在5—20mg/L之间。添加抗生物质可防止菌类污染，减少培养中材料的损失，尤其是快速繁殖中，常因污染而丢弃成百上千瓶的培养物，采用适当的抗生素便可节约人力、物力和时间。尤其对大量通气长期培养，效果更好。

干细胞培养中出现污染

培养细胞受细菌污染后，会出现培养液变混浊，pH改变。也有的培养液肉眼观察无多少改变，只能在镜下发现菌体才知污染。所以，每天应仔细观察。污染后细胞发生病理改变，胞内颗粒增多、增粗，最后变圆脱落死亡，造成试验失败和细胞株(系)丢失。

如果在转染之前293细胞培养过程中没有污染的话，考虑是大抽的质粒污染（这种情况很少，因为质粒加入量非常低）或转染试剂污染。转染试剂污染的可能性高些，建议更换。293细胞的培养中建议加入双抗。 转染293细胞，重新包装病毒，再感染提细胞。你这批感染的很难说能拯救过来。

在细胞培养过程中，面对黑胶虫污染，如何有效处理？以下建议或许能为你提供帮助。首先，换用优质血清可以减少黑胶虫的生成。通常情况下，无需对血清进行灭活处理，因其对细胞生长的作用有限，甚至可能影响血清质量，降低细胞生长速率。

我认为还是细菌或支原体污染，支原体的可能性更大。我养的是干细胞，也看到过这种情况，但是如果分化成成熟细胞，爬片了之后，细胞生长良好。有的时候支原体可通过0。22微米的滤膜，所以，根除支原体污染比较困难。只能是严格遵守无菌操作，希望没事。

培养干细胞时加多大浓度的双抗合适

细胞培养基中常添加“双抗”，即青霉素与链霉素组合，用于预防微生物污染。推荐青霉素浓度为100U/ml，链霉素浓度为0.1mg/ml，按需配制或稀释。抗生素对热环境敏感，应在-20℃长期保存，2-8℃短期保存，配制后一周内用完。研究表明，双抗对真核细胞培养有抑制增殖作用，尤其在原代细胞和干细胞上。

%培养基：基础培养基+5% FBS+1%双抗2% FBS培养基：基础培养基+0.2% FBS+1%双抗成品双抗分装后，20℃保存，1ml离心管分装PBS分装，1×及2×浓度准备4个60mm培养皿，分别装不同浓度的培养液步骤二：实践操作 从4-6周龄大鼠处提取BMSCs，注意避免细胞污染。

在小鼠睾丸生精上皮细胞周期中，SSCs主要在出生后第三天，新生小鼠睾丸曲细精管中存在大量。一般选择p5的小鼠进行SSCs的分离、培养、鉴定以及后续实验。分离SSCs需要精准选择合适时期的小鼠，并且遵循一系列严格的步骤。首先，采集睾丸样品置于3X双抗PBS中，在4℃冰箱中短暂放置。