油酸钠、棕榈酸钠添加剂诱导L-02脂肪肝细胞模型
1、细胞水平研究采用CRISPR/Cas9技术构建FXR敲除（KO）L-02肝脏细胞系北京脂肪原代干细胞特点，通过油酸钠和棕榈酸钠（500μM/250μM）联合诱导L-02细胞脂滴形成北京脂肪原代干细胞特点，结果显示FXR KO L-02细胞脂滴形成增加、细胞内TG和FFAs显著增高。
2、非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）北京脂肪原代干细胞特点的发病机制主要由肝细胞中脂质堆积和氧化应激所致。油酸和棕榈酸是两种常见的游离脂肪酸，它们在体内过量积累会导致脂肪变性。通过将这两种脂肪酸与BSA结合，可以模拟体内高脂环境，从而诱导HepG2细胞发生脂肪变性，形成脂肪肝细胞模型。
3、案例：人原代肝细胞LO-2(HL-7702)，通过油酸钠和棕榈酸钠诱导构建NAFLD模型，并进行多项指标检测以评价模型效果。动物原代肝细胞 应用背景：鉴于人原代肝细胞数量稀缺和伦理道德问题，动物原代肝细胞成为替代选择。
4、模型组细胞用游离脂肪酸FFAs（油酸钠∶棕榈酸钠=2∶1，即500μmol/L油酸钠联合250μmol/L棕榈酸钠）处理48小时，以建立肝细胞脂肪变性模型。细胞活力检测（可选步骤，用于确定FFAs的最佳处理浓度和时间）：使用CCK-8试剂盒检测不同浓度FFAs处理不同时间后AML-12细胞的活力。
5、模型构建：为北京脂肪原代干细胞特点了构建脂肪肝细胞模型，可以使用油酸钠和棕榈酸钠等脂肪酸来诱导细胞脂肪变性。这些脂肪酸通常以摩尔浓度比2：1的比例配制成脂肪酸母液，然后用完全培养基稀释至所需浓度（如2mmol/L）进行造模。
代谢学人--小鼠原代肝细胞提取之实操篇
1、小鼠原代肝细胞的提取是肝脏研究中必须掌握的一项实验技能。本实验采用两步灌流法提取原代肝细胞，操作简便，活细胞获得率高，细胞活力好，为后续的研究提供了良好的基础。
2、肝细胞鉴定 通过糖原PAS染色法及免疫荧光细胞化学染色等方法对肝细胞进行鉴定。这些方法可以特异性地识别肝细胞并区分其他类型的细胞。 细胞活性检测 采用MTT法检测细胞活性。MTT法是一种常用的检测细胞增殖和活性的方法，通过测定细胞对MTT的代谢能力来反映细胞的活性状态。
3、本实验旨在从ICR小鼠（4-6周龄）中分离并培养原代肝细胞，通过标准化的操作流程（SOP），确保肝细胞的分离效率、活性及后续培养的成功率。实验材料 实验动物：ICR小鼠，4-6周龄。实验器材：手术剪、手术镊、玻璃皿、泵、注射器、一次性静脉输液器、显微镜、离心机等。
4、AML12细胞，源于携带人TGF -α基因的转基因小鼠（CD1株，MT42系）的肝细胞，是研究肝脏疾病发展的理想模型。这种细胞属于原代永生化，贴壁生长，上皮细胞样，形态多角形，直径约20-30um，电镜下展现出典型的肝细胞特征，如过氧化物酶体和胆管状结构。
5、IPHASE/汇智和源作为体外研究生物试剂的引领者，凭借先进的设备、专业的技术人员和多年研发的经验，成功推出了C57BL/6品系小鼠悬浮原代肝细胞，为药物开发等试验提供了新选择。
动物造模/脂肪肝细胞模型
高脂诱导北京脂肪原代干细胞特点：使用PA和OA等脂肪酸北京脂肪原代干细胞特点，结合BSA提高溶解性北京脂肪原代干细胞特点，诱导细胞脂肪变性。高糖诱导：使用葡萄糖和/或果糖北京脂肪原代干细胞特点，在脂肪酸存在北京脂肪原代干细胞特点的条件下诱导细胞。酒精诱导：在培养基中加入无水乙醇，模拟酒精性脂肪肝的病理环境。模型评价 油红O染色：观察细胞脂肪变性情况。
通过分组处理（正常组、模型组、阳性对照组和实验组），并使用脂肪酸造模液进行诱导，可以成功构建出脂肪肝细胞模型。动物原代肝细胞 鉴于人原代肝细胞存在数量稀缺和伦理道德等问题，研究人员通常会选择从动物肝脏中分离原代肝细胞进行体外培养和研究。常用的动物包括啮齿动物等。
实验动物：雄性C57BL/6J幼鼠，14日龄。C57BL/6J小鼠是常用的实验动物品系，具有遗传背景清晰、生理特性稳定等优点。造模试剂：DEN和CCl4作为主要的造模试剂，分别用于诱导肝细胞损伤和肿瘤形成。喂养饲料：高脂高糖饲料，用于加速脂肪肝和肝硬化的形成。
油酸和棕榈酸作为游离脂肪酸，可以通过与牛血清白蛋白（BSA）结合形成复合物，用于诱导HepG2细胞形成脂肪肝细胞模型。以下是对该过程的详细解诱导原理 非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）的发病机制主要由肝细胞中脂质堆积和氧化应激所致。
杰特宁
